1. A concentração do tampão
A concentração do tampão TRIS pode afetar a eficiência e a precisão da reação de PCR. Em geral, concentrações de tampão TRIS entre 10-100 mM são apropriadas. Se a concentração do tampão for muito baixa, pode levar a um pH instável do sistema de reação, o que pode afetar a eficiência e a precisão da reação de PCR. Se a concentração do tampão for muito alta, pode inibir a atividade da polimerase, afetando a eficiência e a precisão da reação de PCR.
2. O pH do tampão
O pH do tampão TRIS também afeta a eficiência e a precisão da reação de PCR. Em geral, o pH de uma reação de PCR está entre 8.0-8.8. Se o pH do tampão for muito baixo, pode resultar em uma diminuição na atividade da polimerase, o que pode afetar a eficiência e a precisão da reação de PCR. Se o pH do tampão for muito alto, pode resultar em desnaturação incompleta do molde de DNA, o que pode afetar a eficiência e a precisão da reação de PCR.
3. A força iônica do tampão
A força iônica do tampão TRIS também afeta a eficiência e a precisão da reação de PCR. Em geral, a força iônica do tampão TRIS está entre 50-150mM. Se a força iônica do tampão for muito baixa, pode levar a concentrações de íons instáveis no sistema de reação, o que pode afetar a eficiência e a precisão da reação de PCR. Se a força iônica do tampão for muito alta, pode inibir a atividade da polimerase, afetando a eficiência e a precisão da reação de PCR.
